Chip-seq流程报告(转贴)

一、摘要

实验旨在了解Chip-seq的基本原理。通过模仿文献《Targeting super enhancer associated oncogenes in oesophageal squamous cell carcinoma》的流程,学会利用NCBI和EBI数据库下载数据,熟悉Linux下的基本操作,并使用R语言画图,用Python或者shell写脚本进行基本的数据处理,通过FastQC、Bowtie、Macs、samtools、ROSE等软件进行数据处理,并对预测结果进行分析讨论。

二、材料

1、硬件平台

处理器:Intel(R) Core(TM)i7-4710MQ CPU @ 2.50GHz 2.50GHz

安装内存(RAM):16.0GB

2、系统平台

Windows 8.1,Ubuntu

3、软件平台

① Aspera connect ② FastQC ③ Bowtie

④ Macs 1.4.2 ⑤ IGV ⑥ ROSE

4、数据库资源

NCBI数据库:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/;

EBI数据库:http://www.ebi.ac.uk/;

5、研究对象

加入H3K27Ac 抗体处理过的TE7细胞系测序数据和其空白对照组

加入H3K27Ac 抗体处理过的KYSE510细胞系和其空白对照组

背景简介:食管鳞状细胞癌(OSCC)是一种侵袭性的恶性肿瘤,本文章通过高通量小分子抑制剂进行筛选,发现了一个高度有效的抗癌物,特异性的CDK7抑制剂THZ1。RNA-Seq显示,低剂量THZ1会对一些致癌基因的产生选择性抑制作用,而且,对这些THZ1敏感的基因组功能的进一步表征表明他们经常与超级增强子结合(SE)。ChIP-seq解读在OSCC细胞中,CDK7的抑制作用的机制。

本文亮点:确定了在OSCC细胞中SE的位置,以及识别出许多SE有关的调节元件;并且发现小分子THZ1特异性抑制SE有关的转录,显示强大的抗癌性。

文章PMID: 27196599

三、方法

1、Aspera软件下载及安装

进入Aspera官网的Downloads界面,选中aspera connect server,点击Wwindows图标,选择v3.6.2版本,点击Download进行下载。

[…]